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【生物】不同的限制酶有没有相同的识别位点和切点?


【生物】不同的限制酶有没有相同的识别位点和切点?

  酶具有专一性,一般来讲每种限制酶都有他们所特异性识别的脱氧核苷酸序列。不过在研究中也发现有些不同的限制酶所识别位点和切点是一样的,这些酶称为同座酶。同座酶切割 DNA 时形成相同的末端,可以用 DNA 连接酶连接。如 Xma I 酶和 Sma I 酶都能识别 CCCGGG 序列,并在 C 和 G 之间切割 DNA。

  同时,科学家还发现有这样的一类酶:他们虽然来源不同,识别的靶序列也各不相同,但都能产生相同的黏性末端,称为同尾酶。常用的 Bam H I、 Bcl I 、 Bgl II 、 Xho I 就是一组同尾酶。它们切割 DNA 之后都形成由 GATC 四个核苷酸组成的黏性末端。这样,由于黏性末端相同,同尾酶切割后所产生的 DNA 片段,能够通过其黏性末端之间的碱基互补作用而彼此连接起来。由一对同尾酶分别产生的黏性末端共价结合形成的位点,特称为杂种位点。由于杂种位点的存在使原来的酶切割位点不存在,一般不能再被原来的任何一种同尾酶所识别和切割。例如 Sal I (5' – GTCGAC – 3')和 Xho I (5' – CTCGAG – 3')的切割片段能相连,但所形成的重组片段(5' – GTCGAG – 3')则不能被上述两种酶的任一种酶识别和切割(具体可以看下面的步骤)。 \[ \begin{array}{l} \mathrm{G|TCGAC} \\[6pt]\mathrm{CAGCT|G} \end{array} \to \begin{array}{l} \mathrm{G|} \\[6pt]\mathrm{CAGCT|} \end{array} \tag{1} \]
\[ \begin{array}{l} \mathrm{C|TCGAG} \\[6pt]\mathrm{GAGCT|C} \end{array} \to \begin{array}{l} \mathrm{C|} \\[6pt]\mathrm{GAGCT|} \end{array}\tag{2} \]
\[ \begin{array}{l} \mathrm{G} \\[6pt]\mathrm{CAGCT} \end{array} \ +\ \begin{array}{l} \mathrm{TCGAG} \\[6pt]\quad\quad\quad\mathrm{C} \end{array} \ =\ \begin{array}{l} \mathrm{GTCGAG} \\[6pt]\mathrm{CAGCTC} \end{array}\tag{3} \]


文章作者: q779
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