【生物】不同的限制酶有没有相同的识别位点和切点?
酶具有专一性,一般来讲每种限制酶都有他们所特异性识别的脱氧核苷酸序列。不过在研究中也发现有些不同的限制酶所识别位点和切点是一样的,这些酶称为同座酶。同座酶切割 DNA 时形成相同的末端,可以用 DNA 连接酶连接。如 Xma I 酶和 Sma I 酶都能识别 CCCGGG 序列,并在 C 和 G 之间切割 DNA。
同时,科学家还发现有这样的一类酶:他们虽然来源不同,识别的靶序列也各不相同,但都能产生相同的黏性末端,称为同尾酶。常用的
Bam H I、 Bcl I 、 Bgl II 、 Xho I
就是一组同尾酶。它们切割 DNA 之后都形成由 GATC
四个核苷酸组成的黏性末端。这样,由于黏性末端相同,同尾酶切割后所产生的
DNA
片段,能够通过其黏性末端之间的碱基互补作用而彼此连接起来。由一对同尾酶分别产生的黏性末端共价结合形成的位点,特称为杂种位点。由于杂种位点的存在使原来的酶切割位点不存在,一般不能再被原来的任何一种同尾酶所识别和切割。例如
Sal I (5' – GTCGAC – 3')和 Xho I (5' – CTCGAG –
3')的切割片段能相连,但所形成的重组片段(5' – GTCGAG –
3')则不能被上述两种酶的任一种酶识别和切割(具体可以看下面的步骤)。
\[
\begin{array}{l}
\mathrm{G|TCGAC}
\\[6pt]\mathrm{CAGCT|G}
\end{array} \to \begin{array}{l}
\mathrm{G|}
\\[6pt]\mathrm{CAGCT|}
\end{array} \tag{1}
\]
\[
\begin{array}{l}
\mathrm{C|TCGAG}
\\[6pt]\mathrm{GAGCT|C}
\end{array} \to \begin{array}{l}
\mathrm{C|}
\\[6pt]\mathrm{GAGCT|}
\end{array}\tag{2}
\]
\[
\begin{array}{l}
\mathrm{G}
\\[6pt]\mathrm{CAGCT}
\end{array} \ +\ \begin{array}{l}
\mathrm{TCGAG}
\\[6pt]\quad\quad\quad\mathrm{C}
\end{array} \ =\ \begin{array}{l}
\mathrm{GTCGAG}
\\[6pt]\mathrm{CAGCTC}
\end{array}\tag{3}
\]