【生物】为什么动物细胞培养常用胰蛋白酶分散细胞而不是胃蛋白酶?(书上问题)
最适 pH 不同
胰蛋白酶的最适pH为8.0左右(弱碱性),与细胞培养液的生理pH(7.2~7.4)接近,能够高效分解细胞间连接蛋白。
胃蛋白酶的最适pH为1.5~2.0(强酸性),在培养液的中性环境中几乎无活性,无法有效消化细胞间物质。
切割位点的特异性
胰蛋白酶特异切割赖氨酸(Lys)和精氨酸(Arg)的羧基端肽键,此类氨基酸在细胞间黏附蛋白(如钙黏蛋白)中富集,可针对性破坏细胞连接。
胃蛋白酶切割疏水性/芳香族氨基酸(如苯丙氨酸、酪氨酸),这类位点在细胞间连接蛋白中较少,消化效率低。
以及,胰蛋白酶的作用靶点揭示了细胞间的主要成分为蛋白质类物质(书上另一个问题)。