Q779’s Blog

【生物】同期发情的原理是什么？   同期发情（Estrus Synchronization） 是指通过人为干预，让一群雌性动物在同一时间或相近的时间进入发情期，以便同步排卵，提高繁殖效率。这种技术常用于畜牧业、动物育种和科研实验。   在正常情况下，雌性动物性成熟后，在没有配种或配种却没有受精的情况下，发情呈周期性变化，这种周期性变化称为发情周期。根据卵巢的机能和形态变化，发情周期可以分为两个使其，即卵泡期和黄体期，发情周期实质上就是卵泡期和黄体期的交替循环。   在整个发情周期中，卵泡期持续的时间较短，黄体期持续的时间较长。相对含量较高的孕激素可以抑制发情，一旦孕激素降到低限，卵泡即开始迅速生长发育。所以同期发情的中心问题是控制黄体期的时间，并在合适的时间同时终止黄体期。   控制黄体期的时间，目前主要有两种方法：一种是使用孕激素，另一种是使用前列腺素。使用孕激素（如黄体酮及其类似物）的目的在于使血液中的孕激素保持一定水平，以抑制卵巢中卵泡的生长发育和母畜发情，人为延长黄体期。在这种情况下，即使卵巢中的黄体已经小时，内源激素（黄体酮等）水平下降，但由于外源激素仍在起作用，母畜不...

【生物】透明带是什么？   透明带在大多数动物中是由卵母细胞分泌形成的，由 ZP1, ZP2, ZP3 三种糖蛋白组成。ZP2,ZP3 主要负责精子与透明带的结合和诱发顶体反应，其存在于整个透明带。在小鼠中，ZP1 主要发挥结构支撑功能，以及把 ZP2,ZP3 细丝横向连接起来，构成透明带三维构象。   透明带保护脆弱的卵子和胚胎不受外界伤害，在体内，透明带对着床前的胚胎是必需的，没有透明带，胚胎的分裂球就会彼此分离或黏附在其他胚胎的分裂球上，使其丧失个体独立性，甚至黏附于输卵管上皮而导致胚胎死亡。 从图中也可以看出，哺乳动物在受精作用进行时，精子的尾部是会进入卵细胞的，然后尾部退化。

【生物】特异性抗体是什么？ 我们知道抗体具有特异性，那么“特异性抗体”这种说法是什么意思呢？ 首先需要补充一下两个知识 B 细胞在骨髓中的发育机制确保其只表达一种抗原特异性受体 对于二倍体，细胞基因组中通常存在 2 个可以重排（注：重排过程是随机的，且重排发生在 B 细胞成熟前。具体可以查阅 B 细胞的发育过程）的抗体相关等位基因。一般情况下，特定基因的等位基因中只有一个能够表达，称为等位基因排斥（allelic exclusion），这确保了一个 B 细胞只表达一种抗原特异性受体。 源自同一个初始 B 细胞的子细胞所合成的抗体不改变其结合抗原的特异性 对于一个初始 B 细胞，如果它有机会增殖，在其一生中能产生许多子细胞。源自同一个初始 B 细胞克隆的子细胞产生的抗体可能存在差异，但都不改变其抗原结合的特异性。即使经过类别转换形成了不同类型的抗体，这些抗体结合抗原的特异性仍然相同。因此一个初始 B 细胞及其产生的子细胞只产生结合同一种抗原决定簇的特异性抗体。 感觉这参考书写的有点没头没尾的，不过我们已经知道了答案。 即特异性抗体这种说法强调的是初始 B 细胞活化后产生的子细胞...

【生物】单抗制备过程为何进行两次专一抗体检测？   单抗制备过程中，从免疫小鼠的脾中获得的脾细胞包含多种 B 细胞，他们产生的是不同的抗体。为了得到目标抗体，必然要进行检测，这就是“专一抗体检测”，这里是第一次。   在筛选过程中用的是多孔细胞培养板，每个孔中的杂交瘤细胞不止一个，因此阳性孔中的细胞除了含有分泌需要的特异性抗体的细胞外，还可能含有分泌其他抗体的细胞，也可能含有不分泌抗体的细胞，所以不能直接把阳性孔的细胞用以生产单克隆抗体。必须要进行第二次筛选（第一次是筛选杂交瘤细胞），这个步骤被称为“杂交瘤细胞的克隆化”，通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖。接下来就要进行第二次“专一抗体检测”。检测各孔上清液中细胞分泌的抗体（常用酶联免疫吸附试验法），那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行 3~4 次，直至确信每个孔中增殖的细胞均为单克隆细胞。

【生物】杂交瘤细胞是如何被筛选出来的？ 简单的说就是，B–B融合的会因为无法增殖死亡，瘤–瘤融合的在瘤细胞的取材时选择了存在遗传缺陷的瘤细胞 具体原理太过于专业，讲了也记不住，这里就不详细讲了。

【生物】存在多表位特异性抗体吗？ 单克隆抗体是由单一种类的 B 细胞产生的单一表位特异性抗体 多克隆抗体是由多个种类的 B 细胞产生的多种抗体混合物（多种单一表位特异性抗体） 因此单克隆抗体是单一表位的，多克隆抗体是多个不同表位的。 那么存在多种表位的特异性抗体吗？答案是有的，只不过是通过基因工程设计的抗体（人为设计） 双特异性抗体是含有两种抗原结合位点的抗体，可结合不同表位（通常在两个抗原上）。一般来说，一个抗原结合位点特异性结合靶细胞表面的抗原，而另一个则结合效应细胞表面上的触发分子，例如一种FcγR或CD3/T细胞受体复合物。 双特异性抗体可以改变效应细胞对其自然靶标的特异性，并使其重定向，杀死它原本会忽略的靶标。不同的细胞毒性细胞表达不同的触发分子（受体）。因此，通过改变靶标和效应结合域的特异性，可针对大多数类型的靶细胞产生多种效应应答。或者，通过特异性结合血清免疫球蛋白，可以实现全范围的效应功能（即ADCC、吞噬作用、补体激活和延长血清半衰期）。 双特异性抗体的主要优势包括： 双特异性抗体将效应细胞直接靶向肿瘤细胞，增强其细胞毒性。 双特异性抗体可以同时识别两种分子...

【生物】为什么用特定抗原处理小鼠却会刺激多种 B 细胞活化？   特定抗原处理中含有多种抗原表位（抗原决定簇），在其刺激下体内多个 B 淋巴细胞的克隆细胞被激活并产生针对多种不同抗原表位的抗体。不同抗原的抗原表位数目不同，如白喉类毒素有 8 个抗原表位，流感病毒有 40 多个抗原表位。抗原表位大多存在于抗原的表面，但也有隐藏在抗原内部的，如牛血清蛋白的抗原表位一般是不发挥功能的。抗原分子在酶的作用下使内部的抗原表位暴露出来，才能发挥抗原表位的作用。

【生物】不同种属指的是不同种还是不同属？ 根据百度百科，种属的英语是 species ，就是“界门纲目科属种”中的“种”。 不过这一用法似乎更倾向于描述相距较远的物种，特别是存在生殖隔离的物种。

【生物】植物体细胞杂交如何筛选出杂种细胞？ 原生质体间的融合是随机的，两个不同亲本的原生质体混合后经诱导融合，实际上得到的是各种原生质体的混合物，包括异核体（AB 型）、同核体（AA 型和 BB 型）以及未发生融合的双亲原生质体（A 和 B）。而植物体细胞杂交的目的是要突破不同种属的植物远缘杂交不亲和的障碍，获得具有双亲遗传特性的新的植物类型。因此需要通过筛选获得异核体，即杂种细胞。 筛选杂种细胞的常用方法有 互补选择法 这种方法的原理是利用现成的或诱发产生的各种缺陷型或抗性型的突变体细胞作为融合实验的材料。由于突变体均不能在特定的选择性培养基上生长，而能在该培养基上正常生长的是互补的杂种细胞，因此可将其筛选出来。 机械选择法 利用两种原生质体的某些可见标志（如形态、颜色等差异），对融合产物进行鉴别，筛选出杂种细胞进行单独培养。对于在形态、颜色上难以区分的原生质体融合形成的异核体，可利用不同荧光素分别标记亮亲本的原生质体，然后进行诱导融合，在荧光显微镜下选择同时带有两种荧光标记的杂种细胞。 组织培养筛选法 将“植物细胞对培养基成分和培养条件的要求与反应不同”作为选择杂种细胞的依...

【生物】植物组织培养为何选用蔗糖？ 大量实验证明，蔗糖能支持绝大多数植物离体培养物的旺盛生长。 原因包括： 同样质量分数，蔗糖比葡萄糖形成的渗透压小，后者容易导致植物细胞脱水而生长不良。 蔗糖可以一定程度上减少微生物的污染。 相同物质浓度下，蔗糖提供的能量比葡萄糖多。

【生物】植物可以吸收蔗糖吗？为什么质壁分离可以用蔗糖溶液？ 植物可以吸收蔗糖。即便如此，质壁分离实验依然可以用蔗糖溶液。 高中生物中质壁分离用的是质量分数为 30% 的蔗糖溶液，其浓度明显高于植物细胞液浓度， 又因为质壁分离实验所用时间较短，植物吸收蔗糖的速率远低于单位时间内水分的流失速率。 什么意思呢？意思是即使你可以一口一个鸡蛋，也没法在一秒钟内吃下十个鸡蛋。 事实上，在 0.3 g/mL （即质量分数 30%）的蔗糖溶液中，一些植物细胞发生质壁分离后可以自动复原。

【生物】抗生素对微生物的作用是什么？ 抗生素（英语：antibiotic）又名抗菌素，是微生物（例如：放线菌）的代谢产物或人工合成的类似物，其主要用途是抑制其它种类微生物的生长（抑菌作用）或将它们杀死（杀菌作用），在定义上是一较广的概念，包括抗细菌抗生素、抗真菌抗生素以及对付其他微小病原之抗生素；但临床实务中，抗生素常常是指抗细菌抗生素。抗生素的副作用之一是使肠道正常菌群失调。 注：青霉素属于β–内酰胺类抗生素。 参考文献： [1] https://en.wikipedia.org/wiki/Antibiotic